HE染色步驟： 

1、脫蠟，脫蠟二甲苯Ⅰ、Ⅱ各10分鐘，事先準備好蓋玻片。

2、覆水，100%（Ⅰ、Ⅱ）、90%、80%、70%酒精各5分鐘，自來水沖洗5分鐘×3。

3.、蘇木精染色5分鐘，根據(jù)染色情況，可以適當增加或減少染色時間，流水沖洗。 

4、5%乙酸分化1分鐘，流水沖洗，用吸管滴加乙酸，布滿玻片上的組織即可，分化后顏色變淺了一些，成為藍色。

5、返藍：返藍液，實驗室沒有，也可不用。

6、伊紅染色1分鐘，根據(jù)染色情況，可以適當增加或減少染色時間，流水沖洗。

7、脫水：70%、80%、90%、100%酒精各10秒，二甲苯1分鐘，可以在通風櫥自然晾干再封

片，約5分鐘左右。

8、滴上中性樹膠，封片，用吸管滴上一滴即可，盡量少滴，但壓片后要將組織全部覆蓋完，避免中間有氣泡。

he染色原理：

易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)稱為嗜堿性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia )；而對堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱為中性（neutrophilia)。

構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類很多，它們有不同的等電點。在普通染色法中，染色液的酸堿度為pH6左右，細胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細胞核的染色質(zhì)、腺細胞和神經(jīng)細胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜堿性。

而細胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色，這些物質(zhì)稱為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度，pH值升高時，則原來被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性；pH值降低時，原來被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝浴?/p>

所以說染色液的pH值可以影響染色的反應。脫氧核糖核酸（DNA）兩條鏈上的磷酸基向外，帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。